การวิเคราะห์หาปริมาณน้ำตาลรีดิวซ์และปริมาณน้ำตาลทั้งหมดโดยวิธี Lane and Eyon

Determination of Reducing sugar and Total sugar

หลักการ
Invert sugar (glucose and fructose) จะรีดิวซ์คอปเปอร์ที่อยู่ใน Fehling's solution ให้เป็น red-insoluble cuprous oxide ปริมาตรของสารละลายน้ำตาลซึ่งต้องใช้ทำปฏิกิริยากับ Fehling's solution ที่มีปริมาตรแน่นอนหาได้จากการไตเตรตโดยใช้ methylene blue เป็นอินดิเคเตอร์

ก. สารเคมี

1. Fehling's A solution  เตรียมโดยละลายคอปเเปอร์ซัลเฟต 69.28 g ในน้ำกลั่น เติมน้ำกลั่นลงไปจนได้

ปริมาตรครบ 1,000 ml.

2. Fehling's B solution  เตรียมโดยละลายโปแตสเซียมโซเดียมทาร์เทรตเตตระไฮเดรต 346 g และโซเดียมไฮดรอกไซต์ 100 g ในน้ำกลั่น เติมน้ำกลั่นจนได้ปริมาตรครบ 1,000 ml.
3. Methylene blue 1%
4. Neutral lead acetate solution 10%
5. Potassium oxalate solution 10%
6. Standard dextrose solution 0.2%

ข. การหาค่ามาตรฐานของสารละลาย Fehling's
1. นำ flask ใส่สารละลาย Fehling's A และ B อย่างละ 5 ml.
2. ใส่ glasbit 2-3 เม็ด แล้วใส่ dextrose 15 ml.
3. นำไปต้มบน hot plate จนเดือด เติม methylene blue 2-3 หยด
4. ไตเตรตขณะร้อน จนถึงจุดยุติได้สีแดงอิฐ บันทึกผล

ค. การหา Reducing sugar และ Total sugar
1. ชั่งตัวอย่าง  5 g ใส่ในบีกเกอร์
2. ละลายด้วยน้ำกลั่น 100 ml. ต้มให้เดือดประมาณ 1 ชั่วโมง ทิ้งไว้ให้เย็น
3. เติม 10% Neutral lead acetate solution 2 ml. เขย่าทิ้งไว้ 10 นาที
4. เติม 10% Potassium oxalate solution 0.5 ml. ปรับปริมาตรด้วยน้ำกลั่นให้ได้ 250 ml.
5. กรองด้วยกระดาษกรองเบอร์ 4 แล้วแบ่งเป็น 2 ส่วน

ส่วนที่1 หา reducing sugar โดย นำตัวอย่างที่กรองได้ใส่ในบิวเรต
1. นำ flask ใส่สารละลาย Fehling's A และ B อย่างละ 5 ml.
2. ใส่ glasbit 2-3 เม็ด
3. นำไปต้มบน hot plate จนเดือด เติม methylene blue 2-3 หยด
4. ไตเตรตขณะร้อน จนถึงจุดยุติได้สีแดงอิฐ บันทึกผล

ส่วนที่2 หา total sugar โดยปิเปตตัวอย่างที่กรองมา 10 ml. เติม HCl (1:1) 5 ml. แล้วนำไปต้มจนเดือด 10 นาที ทำให้เย็นลง และปรับให้เป็นกลางด้วย 1N NaOH เติมน้ำกลั่นให้ปริมาตรครบ 100 ml. แล้วนำสารละลายที่ได้ไปใส่ในบิวเรต
1. นำ flask ใส่สารละลาย Fehling's A และ B อย่างละ 5 ml.
2. ใส่ glasbit 2-3 เม็ด
3. นำไปต้มบน hot plate จนเดือด เติม methylene blue 2-3 หยด
4. ไตเตรตขณะร้อน จนถึงจุดยุติได้สีแดงอิฐ บันทึกผล